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超分辨及共聚焦显微成像系统在骨骼细胞研究中的应用

骨骼中发现的成骨细胞和破骨细胞都与骨折的修复有关,成骨细胞和破骨细胞之间的主要区别在于,成骨细胞与骨骼的形成和矿化有关,而破骨细胞与骨骼的分解和吸收有关。

G蛋白偶联受体(GPCRs)是许多疾病的关键药物靶标,而凝血因子II凝血酶受体(F2r)是GPCR家族的重要成员,在破骨细胞中高度表达。然而,F2r在破骨细胞中的作用尚不清楚。为研究F2r对破骨细胞形成、分化、活化、存活和酸化的功能,澳门威斯尼斯入口使用超分辨共聚焦显微成像系统分析三种靶向F2r的shRNA,发现它们能有效降低F2r在不同水平上的表达。


显微成像后处理算法与软件

利用免疫荧光标记破骨细胞标志物Ctsk和相关联细胞骨架结构,通过超分辨及共聚焦显微成像系统的软件能清晰观察到,F2r敲除后显著增加了破骨细胞的活性、数量和大小,以及促进骨吸收和F-肌动蛋白环形成,增加了破骨细胞标记基因表达。


F2r基因下调促进破骨细胞形成

通过荧光和传统标记方法可以观察到,F2r过表达阻断了破骨细胞的形成、成熟和酸化,表明F2r对破骨细胞的形成和功能有负面影响。

F2r过表达抑制破骨细胞形成

免疫荧光标记能够帮助准确的识别目标检测基因蛋白,通过超分辨及共聚焦显微成像系统能够对F2r过表达进行定量分析,还可以进一步确定其亚细胞定位和共定位关系,帮助研究者进一步探究其上下游信号关系。

超分辨及共聚焦显微成像系统

荧光标记方法相比传统的染色方法具有更好的对比度,能同时标记更多的目标蛋白基因。澳门威斯尼斯入口自研的超分辨及共聚焦显微成像系统,突破了传统光学分辨率限制,能够观察到更加细微的结构,解决传统荧光显微镜下成像质量模糊导致无法清晰观察样品的问题。澳门威斯尼斯入口愿在科研路上与您同行,祝您一臂之力。


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